PII seinverwerker proteïene is wydverspreid in prokariote en plante waar hulle 'n menigte anaboliese reaksies beheer.Doeltreffende oorproduksie van metaboliete vereis dat die stywe sellulêre beheerkringe verslap word.Hier demonstreer ons dat 'n enkele punt mutasie in die PII seinproteïen van die sianobakterie Synechocystis sp.PCC 6803 is voldoende om die arginienbaan te ontsluit wat oorakkumulasie van die biopolimeer sianofisien (multi-L-arginiel-poli-L-aspartaat) veroorsaak.Hierdie produk is van biotegnologiese belang as 'n bron van aminosure en poliasparaginsuur.Hierdie werk is 'n voorbeeld van 'n nuwe benadering van roete-ingenieurswese deur pasgemaakte PII-seinproteïene te ontwerp.Hier is die gemanipuleerde Synechocystis sp.PCC6803-stam met 'n PII-I86N-mutasie het arginien oorgeakkumuleer deur konstitutiewe aktivering van die sleutelensiem N-asetielglutamaatkinase (NAGK). In die gemanipuleerde stam BW86 is in vivo NAGK-aktiwiteit sterk verhoog en gelei tot 'n meer as tienvoudig hoër arginieninhoud as in die wilde-tipe.Gevolglik het stam BW86 tot 57 % sianofisien per sel droë massa onder die getoetsde toestande opgehoop, wat die hoogste opbrengs van sianofisien tot op datum is.Stam BW86 het sianofisien in 'n molekulêre massareeks van 25 tot >100 kDa geproduseer;die wilde-tipe het die polimeer in 'n reeks van 30 tot >100 kDa geproduseer. Die hoë opbrengs en hoë molekulêre massa van sianofisien wat deur stam BW86 geproduseer word tesame met die lae voedingsbehoeftes van sianobakterieë maak dit 'n belowende middel vir die biotegnologiese produksie van sianofisien.Hierdie studie demonstreer verder die uitvoerbaarheid van metaboliese pad-ingenieurswese deur die PII-seinproteïen te gebruik, wat in talle bakteriese voorkoms voorkom.
