Produkte

Meer as 70% van laegraadse gliome dra 'n heterosigotiese R132H-mutasie in die geen wat vir isocitraat dehidrogenase 1 (IDH1) kodeer.Dit gee die ensiem die nuwe vermoë om α-ketoglutaraat na 2-hidroksiglutaraat om te skakel, wat uiteindelik lei tot tumorgenese.Die hoofbron van 2-hidroksiglutaraatproduksie is glutamien, wat, in kanker, ook 'n bron vir trikarboksielsuursiklus (TCA) anaplerose is.'n Alternatiewe bron van anaplerose is piruvaatvloei via piruvaatkarboksilase (PC), wat 'n algemene pad in normale astrasiete is.Die doel van hierdie studie was om te bepaal of PC dien as 'n bron van TCA anaplerose in IDH1 mutante selle waarin glutamien gebruik word vir 2-hidroksiglutaraat produksie. Onsterflike normale menslike astrasiete wat gemanipuleer is om heterosigotiese mutant IDH1 of wild-tipe IDH1 uit te druk, is ondersoek.Flux van piruvaat via PC en via piruvaat dehidrogenase (PDH) is bepaal deur gebruik te maak van magnetiese resonansspektroskopie om die etikettering van [2-¹³C]glukose-afgeleide ¹³C-label gelei glutamaat en glutamien te ondersoek.Aktiwiteitstoetse, RT-PCR en Western blotting is gebruik om die uitdrukking en aktiwiteit van relevante ensieme te ondersoek.Die Kankergenoomatlas (TCGA) data is ontleed om die uitdrukking van ensieme in menslike glioommonsters te bepaal. Vergeleke met wildtipe selle het mutante IDH1-selle fraksionele vloed deur PC aansienlik verhoog.Dit was geassosieer met 'n beduidende toename in rekenaaraktiwiteit en uitdrukking.Terselfdertyd het PDH-aktiwiteit aansienlik afgeneem, waarskynlik bemiddel deur aansienlik verhoogde inhiberende PDH-fosforilering deur PDH-kinase 3. In ooreenstemming met die waarneming in selle, het ontleding van TCGA-data 'n beduidende toename in PC-uitdrukking in mutant IDH-uitdrukking menslike glioommonsters aangedui in vergelyking met wilde- tipe IDH.Ons bevindinge dui daarop dat veranderinge in PC en PDH 'n belangrike deel van sellulêre aanpassing by die IDH1 mutasie kan wees en kan dien as potensiële terapeutiese teikens.