ONPG CAS:369-07-3 98.0% Min Wit tot Af - Wit poeier
| Katalogusnommer | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| Produk Naam | ONPG(2-Nitrofenyl-beta-D-galaktopiranosied) |
| Molekulêre Formule | C12H15NO8 |
| Molekulêre gewig | 301,25 |
| Berging besonderhede | 2 tot 8 °C |
| Geharmoniseerde Tariefkode | 29400000 |
Produk spesifikasie
| Suiwerheid (HPLC) | Min.98,0% |
| Voorkoms | Wit tot naaswit poeier |
| Oplossing(1% in water) | Helder, kleurlose tot effens geel oplossing |
| Waterinhoud(Karl Fisher) | Maks.0,5% |
| Spesifieke optiese rotasie [α]D20(c=1, H2O) | -65.0 °C tot -73.0 °C |
Bespreking oor ONPG-toets (β-galaktosidase-toets)
Vrae is onlangs gereeld geopper: 1. Waarom kan die ONPG-toets gebruik word om vertraagde laktosefermentasie te onderskei?2. Waarom stel die nasionale standaard dat dit nodig is om 3% natriumchloriedtrisakkariedyster (of trisakkariedyster) vir die ONPG-toets te gebruik?3. Vir Vibrio parahaemolyticus, wanneer OPNG-toets uitgevoer word, hoekom moet tolueen druppelsgewys bygevoeg word volgens die standaard?Wat is die funksie?
Ons maatskappy het baie inligting nagegaan, dit opgesom en dit hieronder met jou gedeel:
Beginsel: Die Chinese naam van ONPG is o-nitrobenseen-β-D-galaktopiranosied.ONPG kan deur β-galaktosidase tot galaktose en geel o-nitrofenol (ONP) gehidroliseer word, dus kan die aktiwiteit van β-galaktosidase deur die kleurverandering van die kultuurmedium opgespoor word.
Laktose is 'n suiker wat die meeste mikroörganismes moet opspoor.Die metabolisme daarvan vereis twee ensieme, een is selpermease, laktose gaan selle binne onder die werking van permease;die ander is β-galaktosidase, wat laktose in galaktose hidroliseer.Laktose en glukose.β-Galaktosidase kan ook direk op ONPG inwerk om dit in galaktose en geel o-nitrofenol (ONP) te hidroliseer.Dit kan binne 24 uur gedoen word, selfs met laktose-vertraagde fermenteerders.Daarom verduidelik dit die waarnemingsresultate van die pluk van kultuur 1 vanaf die agar-skuins en die inenting daarvan in 'n volle sirkel by 36°C vir 1-3 uur en 24 uur.As β-galaktosidase geproduseer word, sal dit binne 1-3 uur geel word, as daar nie so 'n ensiem is nie, sal dit nie binne 24 uur van kleur verander nie.
Volgens bogenoemde twee ensieme kan mikroörganismes in die volgende kategorieë verdeel word:
1 laktose-fermenterende (18-24 uur) bakterieë met permease en β-galaktosidase P + G +;
2 Vertraagde laktosefermenteerders (wat langer as 24 uur neem) wat nie permease het nie, maar het galaktosidase: P-G+.
3 Nie-laktosefermenteerders wat beide permease en galaktosidase ontbreek: P-G-.
Die ONPG-toets kan gebruik word om laktose-lag-fermenterende bakterieë (P-G+) van nie-fermenterende laktosebakterieë (PG-) te onderskei, soos:
1 Onderskei laat-laktose-fermenteerders (P- G+) van nie-laktose-fermenteerders (P- G-).
(a) Citrobacter (+) en Salmonella arizonae (+) van Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) van Shigella sonnei (-).
Waarom is die ONPG-toets uitgevoer met 'n oornagkultuur op 3% natriumchloried ystertrisakkaried (ystertrisakkaried)?Ons maatskappy het baie inligting geraadpleeg, maar daar is geen duidelike verklaring nie.Slegs op die FDA-webwerf word geskryf dat "Ent kulture wat getoets moet word op driedubbele suiker-ysteragar-skuins en inkubeer vir 18 uur by 37°C (of ander toepaslike temperatuur, indien nodig). Voedingstof (of ander) agar-skuins wat 1.0 bevat. % laktose kan ook gebruik word."beteken: die toetsbakterieë is op die trisakkaried-ystermedium geënt en vir 18 uur by 37°C gekweek.Voedingagar-skuins (of ander) medium wat 1% laktose bevat, is ook aanvaarbaar.Daarom word afgelei dat die trisakkariedystermedium laktose bevat.Na oornaggroei het die bakterieë 'n goeie aktiewe β-galaktosidase geproduseer.Deur sulke bakterieë te gebruik, kan ONPG vinniger deur β-galaktosidase ontbind word.Die eksperimentele verskynsel word vinniger en beter gemanifesteer.Daarbenewens is druppelsgewyse byvoeging van tolueen en 'n waterbad vir 5 min alles om β-galaktosidase ten volle vry te stel.
