X-GAL CAS:7240-90-6 98% wit tot naaswit kristallyne poeier
| Katalogusnommer | XD90008 |
| Produk Naam | X-Gal (5-Broom-4-chloor-3-indoliel-beta-D-galaktopiranosied) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Molekulêre Formule | C14H15BrClNO6 |
| Molekulêre gewig | 408,63 |
| Berging besonderhede | -2 tot -6 °C |
| Geharmoniseerde Tariefkode | 29400000 |
Produk spesifikasie
| Voorkoms van Oplossing | Helder, kleurlose tot liggeel oplossing (50mg/ml in DMF:MeOH, 1:1) |
| Spesifieke optiese rotasie | -61,5 +/- 1 |
| Voorkoms | Wit tot spierwit kristallyne poeier |
| Suiwerheid HPLC | min 99% |
| Oplosbaarheid (5 % in DMF) | Oplosbaar (5% w/v, DMF) |
| Water KF | maksimum 1% |
| Assay (HPLC op watervrye basis) | min 98% w/w |
Gebruike van X-gal
X-gal (ook afgekort BCIG vir 5-broom-4-chloor-3-indolyl-β-D-galaktopiranosied) is 'n organiese verbinding wat bestaan uit galaktose gekoppel aan 'n gesubstitueerde indool.Die verbinding is in 1964 deur Jerome Horwitz en medewerkers gesintetiseer. Die formele chemiese naam word dikwels verkort tot minder akkurate, maar ook minder omslagtige frases soos bromchloroindoksielgalaktosied.Die X van indoksiel kan die bron van die X in die X-gal sametrekking wees.X-gal word dikwels in molekulêre biologie gebruik om te toets vir die teenwoordigheid van 'n ensiem, β-galaktosidase, in die plek van sy gewone teiken, 'n β-galaktosied.Dit word ook gebruik om aktiwiteit van hierdie ensiem in histochemie en bakteriologie op te spoor.X-gal is een van baie indoksielglikosiede en esters wat onoplosbare blou verbindings soortgelyk aan indigo kleurstof lewer as gevolg van ensiem-gekataliseerde hidrolise.
X-gal is 'n analoog van laktose, en kan dus gehidroliseer word deur die β-galaktosidase ensiem wat die β-glikosidiese binding in D-laktose splits.X-gal, wanneer dit deur β-galaktosidase geklief word, lewer galaktose en 5-broom-4-chloor-3-hidroksiindool - 1. Laasgenoemde dimeriseer dan spontaan en word geoksideer in 5,5'-dibroom-4,4'-dichloro -indigo - 2, 'n intens blou produk wat onoplosbaar is.X-gal self is kleurloos, so die teenwoordigheid van blou-gekleurde produk kan dus gebruik word as 'n toets vir die teenwoordigheid van aktiewe β-galaktosidase.Dit laat ook toe dat bakteriële β-galaktosidase (sogenaamde lacZ ) as 'n verslaggewer in verskeie toepassings gebruik kan word.
In twee-hibriede analise kan β-galaktosidase as 'n verslaggewer gebruik word om proteïene te identifiseer wat met mekaar in wisselwerking tree.In hierdie metode kan genoombiblioteke gekeur word vir proteïeninteraksie met behulp van gis of bakteriese sisteem.Waar daar 'n suksesvolle interaksie is tussen proteïene wat gekeur word, sal dit lei tot die binding van 'n aktiveringsdomein aan 'n promotor.Indien die promotor aan 'n lacZ-geen gekoppel is, sal die produksie van β-galaktosidase, wat lei tot die vorming van blou-gepigmenteerde kolonies in die teenwoordigheid van X-gal, dus 'n suksesvolle interaksie tussen proteïene aandui.Hierdie tegniek kan beperk word tot siftingsbiblioteke met 'n grootte van minder as ongeveer 106. Die suksesvolle splitsing van X-gal skep ook 'n merkbare vieslike reuk as gevolg van die vervlugtiging van indool.
Aangesien X-gal self kleurloos is, kan die teenwoordigheid van blou-gekleurde produk gebruik word as 'n toets vir die teenwoordigheid van 'n aktiewe β-galaktosidase.
Hierdie maklike identifikasie van 'n aktiewe ensiem laat toe dat die geen vir βgalaktosidase (die lacZ-geen) as 'n verslaggewergeen in verskeie toepassings gebruik kan word.
