Produkte

Serien/treonien-proteïenfosfatases is in baie patogene bakterieë beskryf as noodsaaklike ensieme wat betrokke is by fosforilasie-afhanklike seintransduksieweë en dikwels geassosieer met die virulensie van hierdie organismes.'n Inspeksie van Mycoplasma synoviae genoom het die teenwoordigheid van 'n geen (prpC) geopenbaar wat kodeer vir 'n vermeende proteïenfosfatase van die proteïenfosfatase 2C (PP2C) subfamilie.Hier rapporteer ons 'n volledige biochemiese karakterisering van M. synoviae fosfatase (PrpC) en die besondere rol van metaalione in die struktuur-funksie verhouding van hierdie ensiem.PrpC aminosuurvolgorde-analise het aan die lig gebring dat al die residue betrokke by die dinukleêre metaalsentrum en die vermeende derde metaalioon-koördinerende residue, bewaar in PP2C fosfatases, teenwoordig is in PrpC.PrpC is 'n monomere proteïen wat in staat is om fosfo-substrate te defosforileer met Mn(2+)-ione se afhanklikheid.Termiese stabiliteitsanalise het die ensiemstabiliteit by ligte temperature en die invloed van Mn(2+)-ione in hierdie eienskap gedemonstreer.Massaspektrometrie-analise het voorgestel dat drie metaalione aan PrpC bind, waarvan twee met 'n oënskynlike hoë-affiniteitskonstante.Mutasie-analise van die vermeende derde metaal-koördinerende residue, Asp122 en Arg164, het aan die lig gebring dat hierdie variante 'n swakker binding van mangaanione vertoon het, en dat beide mutasies PrpC fosfatase aktiwiteit beïnvloed het.Volgens hierdie resultate is PrpC 'n metaalafhanklike proteïenfosfatase-lid met 'n verbeterde stabiliteit in die holovorm en met Asp122, moontlik geïmpliseer in die derde metaalbindingsplek, noodsaaklik vir katalitiese aktiwiteit.