Produkte

Monogalaktopiranosiede van fluoressensie en fluoresseenmetielester: sintese, ensiematiese hidrolise deur gebiotnyleerde β-galaktosidase, en bepaling van translasiediffusiekoëffisiënt

Fluoresienmonoglikosiede (d-galaktopiranosied (FMG) en d-glukopiranosied) en hul metielester (MFMG) is berei uit asetobromoglukose/galaktose en fluoressensiemetielester in goeie opbrengste.Ensiematiese hidrolise-eksperimente (met gebiotinileerde β-galaktosidase) van die galakto-derivate is uitgevoer en kinetiese parameters is bereken.'n 15-20 keer toename in die fluoressensie-intensiteit is tydens die hidrolise waargeneem.'n Lineêre toename van fluoressensie is op kort tyd en lae konsentrasie van substraat opgemerk, wat hierdie verbindings bruikbare en sensitiewe probes vir galaktosidases maak.Die grootte van die Michaelis–Menten konstante (Km) waarde vir MFMG is hoër as dié van FMG wat 'n moontlike konformasieverandering van die fluorogeniese substraat voorstel.Km-waarde vir gebiotinileerde β-Gal met FMG is laer as dié vir die inheemse ensiem.Hierdie waarneming dui op hoër substraataffiniteit van die gebiotinileerde ensiem in vergelyking met die inheemse ensiem.Translasiediffusiekoëffisiënte is gemeet, vir beide fluorogeniese substrate en beide die produkte, deur gebruik te maak van fluoressensie-korrelasiespektroskopie.Translasiediffusiekoëffisiënte vir fluorogeniese substrate en die ensiematiese hidroliseprodukte is gemeet om soortgelyk te wees, in die reeks van 3.5–4.5 × 10−10 m2 s−1.Dus is 'n verbetering of vertraging van die ensiematiese kinetika as gevolg van verskil in translasiemobiliteit van substraat en produk nie so duidelik nie.