Produkte

Mycobacterium tuberculosis kan vir dekades in die menslike gasheer voortduur.Streng reaksieweë wat anorganiese polifosfaat [poly(P)] insluit, wat onderskeidelik gesintetiseer en gehidroliseer word deur polifosfaatkinase (PPK) en eksopolifosfatase (PPX), word geglo om 'n sleutel regulatoriese rol in bakteriële volharding te speel.Ons wys hier dat M. tuberculosis poly(P) akkumulasie tydelik gekoppel is aan basillêre groeibeperking.Ons identifiseer ook M. tuberculosis Rv1026 as 'n nuwe eksopolifosfatase met hidrolitiese aktiwiteit teen langketting poli(P).Deur 'n tetrasiklien-induseerbare uitdrukkingstelsel te gebruik om uitdrukking van Rv1026 (ppx2) af te breek, het ons gevind dat M. tuberculosis poly(P)-akkumulasie lei tot vertraagde groei en verminderde vatbaarheid vir isoniazied, verhoogde weerstand teen hitte en suur pH, en verbeterde intrasellulêre oorlewing tydens makrofage infeksie.Deur transmissie-elektronmikroskopie het die ppx2 knockdown-stam verhoogde selwanddikte getoon, wat geassosieer is met verminderde selwanddeurlaatbaarheid vir hidrofiele middels eerder as induksie van geneesmiddeluitvloeipompe of veranderde biofilmvorming relatief tot die leë vektorbeheer.Transkriptomiese en metabolomiese analise het 'n metaboliese verskuiwing van die ppx2-afskakeling aan die lig gebring wat gekenmerk word deur verminderde transkripsie en translasie en 'n afskuif van gliserol-3-fosfaatvlakke.Samevattend speel poli(P) 'n belangrike rol in M. tuberculosis-groeibeperking en metaboliese afskuif en dra by tot antibiotika-verdraagsaamheid deur veranderde selwanddeurlaatbaarheid. Die streng reaksie, wat die regulatoriese molekules anorganiese polifosfaat [poly(P)] en (p) betrek )ppGpp, word geglo om Mycobacterium tuberculosis-volharding te bemiddel.In hierdie studie het ons 'n nuwe ensiem (Rv1026, PPX2) geïdentifiseer wat verantwoordelik is vir die hidrolisering van langketting poli(P).'n Geneties gemanipuleerde M. tuberculosis-stam wat 'n tekort aan die ppx2-geen het, het verhoogde poli(P)-vlakke getoon, wat geassosieer is met vroeë bakteriële groeistop en verminderde vatbaarheid vir die eerstelyn-middel isoniazid, sowel as verhoogde bakteriese oorlewing tydens blootstelling aan stres toestande en binne makrofage.Relatief tot die kontrolestam het die mutant verhoogde dikte van die selwand en verminderde geneesmiddeldeurlaatbaarheid getoon.Globale geenuitdrukking en metabolietanalise het verminderde uitdrukking van die transkripsie- en translasiemasjinerie en 'n verskuiwing in koolstofbronbenutting aan die lig gebring.Samevattend is regulering van die poli(P)-balans krities vir aanhoudende vorming in M. tuberculosis.